< > 1.试验方法 取BALB/C小鼠20只,体重18~22g,雌雄各半,随机分为2组,每只鼠背部剃毛约3cm2,第1组为空白对照组,于背部剃毛处涂抹芝麻油0.05ml/10g,第2组为镇银膏组,于背部剃毛处涂抹镇银膏0.05ml/10g,隔日1次共7次。按常规方法取脾脏并制成单个核细胞悬液,以1640完全培养液(CM)调整细胞浓度为l×108/ml作为效应细胞。靶细胞为传代72h培养的L929细胞,经洗涤,用CM调整靶细胞浓度为l×106/ml细胞浓度。取上述靶细胞悬液,加入96孔平底培养板,每孔0.1ml;放于37OC孵育1小时,使靶细胞贴壁成一单层细胞,再向每孔加0.1ml效应细胞(一式三份)对照孔加0.1ml l640,再放37OC孵育4小时,取出去培养液,再用0.15M PH7.2 PBS洗一次,以除去效应细胞和被杀伤而脱落下来的靶细胞,弃去BS液,每孔加0.2ml0.5醋酸乙醇(50%乙醇配制),溶解留下的靶细胞,摇匀,冰箱放置过夜,自每孔吸取0.1ml至另一96孔板,用酶标仪在540nm处测定光密度,参考波长为630nm。按下列公式计算溶解百分率:
< > 对照孔OD值 - 实验孔OD值
< > 溶解%= ×100%
< > 对照孔OD值
< > 2.给药途径 皮肤
< > 3.给药次数 隔日1次,共7次
< > 4.试验对照(1)空白对照芝麻油(2)己知阳性药物对照及选择依据,本试验未设阳性药物对照组,理由同前实验。
< > 5.试验结果见表5
表5:镇银膏对小鼠NK细胞活性的影响
组别 |
动物数 |
溶解% |
空白对照组
镇银膏中剂量组 |
8
8 |
61.27±5.78
80.46±4.16 ** |
与空白对照组比较 ** P<0. 01
结果表明,镇银膏0.05ml/10g,可非常显著的增强小鼠NK细胞杀伤靶细胞活性(P<0. 01)。
六,数据及统计学处理:
上述试验数据均采用T检验
七、试验结论:
㈠、镇银膏高、中、低剂量对小鼠和大鼠阴道上皮细胞有丝分裂均有明显的抑制作用。
㈡、镇银膏高、中剂量对小鼠尾鳞片颗粒细胞层的形成有明显的促进作用,但低剂量作用不明显。
㈢、镇银膏高、中、低剂量可明显提高小鼠外周血T淋巴细胞活性,而以中剂量更为显著。
㈣、镇银膏可明显增强小鼠NK细胞杀伤靶细胞的活性。
八、试验参考文献出处
[1]黄畋、林熙然、利用实验动物模型研究中草药内用治疗银屑病的作用,中西医结合杂志 1980.4(7):428
[2]黄畋、林熙然 石蒜碱对表皮角化及细胞有丝分裂的影响 中华皮肤科杂志1989, 18(1):37。
[3]苏秀玲等 维胺酸等维甲类衍生物对小鼠银屑病模型的实验治疗 中华皮肤科杂志 1989,22(6):400
[4]麻致中等 华蟾素治疗银屑病的临床和实验观察 中华皮肤科杂志 1989,22(4): 236
[5]刘贞富 等银屑病患者外周血T淋巴细胞及其亚群和天然杀伤(NK)细胞活性的研究 中华皮肤科杂志1989,22(5):296
[6]麻致中等 银屑病皮损直接免疫荧光及T细胞ANAE活性研究 中华皮肤科杂志1989,22(4):225
[7]喻永平等 用比色法测定P0LY1,C和CP菌苗对小鼠NK活性的增强作用 中华微生物学及免疫学杂志 1988,8(3): 193
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